超声波细胞破碎仪的常见问题及解决办法

超声波细胞破碎直接沉淀直接加入样品1b缓冲液，加入5ul巯基乙醇，混匀，离心，煮沸10min，直接加载，染色和脱色步骤如下：将胶水放入适量染色中在微波炉中液体1分钟（以下）可以进行适当的乙酸添加，并且可以在微波炉中用大量的水（自来水）代替染色溶液10分钟。

超声波系列的超声细胞破碎器在表达重组蛋白后超声破碎细胞，使用400w冰浴，破碎2s 1s，但在短时间内产生大量泡沫，影响破碎力量。 pbs和tris缓冲区都是这样的。它没有完全破碎，我感兴趣的蛋白质就在这些完整的细胞中。

1.由于未设置探头位置，将生成气泡。探头必须靠近底部，大约1厘米（我通常距离底部0.5毫米）。功率会因仪器而异，但您可以观察液位，波动但不太强烈。

2.打破3S停止10S，打破二三十次看。

3.还要注意喇叭的位置。如果声音错误，应及时调整。另外，从细菌浓度的观点出发可以考虑。压碎时尽量增加体积，强度*不应超过60％。

4.尝试8s 8s。对于某些细菌蛋白质，您的方法很难散热，导致蛋白质变性产生气泡。暂停时间稍长。这在包涵体的形式中更为常见。

链霉菌（放线菌）超声处理（超声细胞破破坏）的条件是什么？

预处理通常是配置成一定浓度的细菌悬浮液。

使用超声波破坏时使用的具体条件是：

（1）取约的24h培养液，以5000r / min离心5min，收集细菌。

（2）用pH7.5的Na2HPO-NaH2PO缓冲液洗涤3次，然后用缓冲液制备1：3的细菌悬浮液。放在40

mL大型塑料试管。

（3）（超声波破碎机）将大塑料试管放入冰浴中，用超声波破碎（功率200W，1/2“探头，压碎30s，间歇30S）。

（4）将破碎的液体以12,000r / min的速度高速离心30分钟，收集细胞碎片和上清液。